產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | E0701 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 乳腺導(dǎo)管癌;女性 |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡稱:BT-483細(xì)胞
中文名稱:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
規(guī)格:瓶
種屬:人
來源:乳腺導(dǎo)管癌;女性
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
單位:
貨號:E0701
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
BT-483細(xì)胞 | 瓶 | E0701 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實驗用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實驗提供細(xì)胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項:
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%(過量不足,過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時細(xì)胞消化適度)進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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羽扇豆醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Lupeol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨鈣素(OT)ELISA試劑盒 ,英文名: OT ELISA Kit
SNU-638人細(xì)胞 Human gasic cancer cells SNU-638 1640+10% FBSDL-乳酸鋰(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRLithium lactate
IFNB1 Protein Human 重組人 Ierferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)堿式碳酸鎂五水(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCMagnesium carbonate basic pentahydrate
NCI-H2170(人肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 WI-38(胚肺細(xì)胞)那格列奈質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Nateglinide
lovo, 人細(xì)胞那格列奈質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Nateglinide
GAD2 Others Mouse 小鼠 GAD65 / GAD2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 丁溴東莨菪堿 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR(-)scopolamine N-butyl bromide
BT-483細(xì)胞CL-0300NCI-H661(人大細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2核苷酸5’-一1酸腺苷鈉鹽;AMP鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAdenosine 5‘-monophosphate salt
IL1R1 Others Mouse 小鼠 IL1R1 / CD121a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) CTP.Na2;胞苷-5’-三1酸二鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRCTP.Na2
小鼠胰腺星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL5-甲基尿苷質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR5-Methyluridine
A9小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 A9 mice subcutaneous connective tissue cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBSD-核糖(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品D-(-)-Ribose
IL1B Protein Rat 重組大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標(biāo)簽)D-核糖質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRD-(-)-Ribose
注意事項:
BT-483細(xì)胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點燃酒精燈:注意火焰不能太?。?/span>
(5)嚴(yán)格的無菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。