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產(chǎn)品簡稱：MCF-12A細(xì)胞
中文名稱：人乳腺上皮細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：非致瘤性乳腺上皮細(xì)胞；女性

培養(yǎng)基：EMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E0679

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實驗用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實驗提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：

HumanElastaseELISA試劑盒人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-(4-Fluorobenzyl)-2-chlorobenzimidazole  84946-20-3  中文名：  分子式：C14H10ClFN2 

HumanEerovirusELISA試劑盒人腸病毒(Eerovirus)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  (2-Benzothiazolylthio)acetic acid  6295-57-4  中文名：2-(苯并噻唑基硫代)乙酸  分子式：C9H7NO2S2 

humanEchoVirusIgM,ECHOIgMELISA試劑盒人艾柯病毒IgM(ECHOIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1,2,3-Triacetyl-5-deoxy-D-ribose  62211-93-2  中文名：  分子式：C11H16O7 

HumanechinococcusaibodyIgGELISA試劑盒人包蟲抗體IgGELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1,2-Benzanthraquinone  中文名：1,2-苯并奎寧酮  分子式：C18H10O2 

HumanE-Cadherin,E-CadELISA試劑盒人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1,2-Bis(3-indenyl)ethane  18657-57-3  中文名：1,2-雙(3-茚基)乙烷  分子式：C20H18
土大黃苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Rhapontin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitcTn-Ⅰ人心肌肌鈣蛋白Ⅰ規(guī)格：48T/96T

鹽酸苯海索（標(biāo)準(zhǔn)品）  Benzhexol hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)ELISA試劑盒 ，英文名： GAD-Ab-IgM ELISA Kit

葉酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  Folic acid  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA檢測試劑盒Ratai-endothelialcellaibody,AECAELISAKit 96T/48T

葡萄糖酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)  Calcium gluconate  質(zhì)量規(guī)格：檢查 人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)試劑盒 Human ALCAM ELISA Kit

雙羥萘酸噻嘧啶（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pyrantel pamoate  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 Ricinuscommunisagglinin,RCAELISAKit蓖麻凝集素(RCA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

雙羥萘酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pamoic acid  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 P21基因表達(dá)北方雜交分析試劑盒5

酚酞（標(biāo)準(zhǔn)品）  Phenolphthalein  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 Porcineierleukin8,IL-8ELISA試劑盒豬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

香草醛（熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品）   Vanillin  質(zhì)量規(guī)格：熔點(diǎn)測定 小鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)ELISA試劑盒 ，英文名： GAD-Ab-IgG ELISA Kit

環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司  Ciclopirox  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA檢測試劑盒RatannexinⅤ,ANX-ⅤELISAKit 96T/48T

環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ciclopirox  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(LR)試劑盒 Human leukoregulin,LR ELISA Kit
TEK Others Cynomolgus 食蟹猴 Tie2 / TEK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 磺胺甲惡唑（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Sulfamethoxazole(SMZ)

人細(xì)胞;Hela硫酸頭孢匹羅質(zhì)量規(guī)格：>760μg/MG,BR Cefpirome Sulfate

HEK-293細(xì)胞，Ad5DNA轉(zhuǎn)化的胚腎細(xì)胞 恒河猴胚腎細(xì)胞,FRhK-4細(xì)胞 CL-0251MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞)5×106cells/瓶×2尼美舒利質(zhì)量規(guī)格：>99%Nimesulide

A875(人色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2硝酸咪康唑質(zhì)量規(guī)格：>99%Miconazole Nitrate

HBEpC-c 人上皮細(xì)胞(HBEpC) 500,000cells 主動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)硝酸咪康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Miconazole Nitrate
MCF-12A細(xì)胞CL-0178OVCAR-3(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2藜蘆醛(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR3,4-Dimethoxybenzaldehyde

FZD5 Others Mouse 小鼠 Frizzled-5 / FZD5 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-羥基苯(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR3-Hydroxybenzaldehyde

人前脂肪細(xì)胞-皮下裂解物HPA-s L間羥基肉桂酸(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR3-Hydroxycinnamic acid

小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L1 癌細(xì)胞，MDA-MB-435S細(xì)胞 MA891細(xì)胞，小鼠癌細(xì)胞4,4-二羥基二苯砜(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR4,4-Dihydroxydiphenyl sulfone

人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;CGM12-溴代萘質(zhì)量規(guī)格：>98%2-Bromonaphthalene
注意事項：
MCF-12A細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太??；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。