產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | E0875 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 食管鱗癌;女性 |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
帛科細(xì)胞工廠適用于工業(yè)批量 ,如疫苗,單克隆抗體或者制藥工業(yè),也適用于實驗室操作和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。方便實用,有效避免污染。
產(chǎn)品名稱 | KYSE150細(xì)胞 |
單位 | 瓶 |
貨號 | E0875 |
產(chǎn)品簡稱:KYSE150細(xì)胞
中文名稱:人食管鱗癌細(xì)胞
規(guī)格:瓶
種屬:人
來源:食管鱗癌;女性
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
單位:
貨號:E0875
細(xì)胞的凍存:
1.先將凍存管放入4℃冰箱,約40min。
2.接著置于-20℃冰箱,約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過夜。
4.置于液氮罐中長期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時做好凍存記錄,在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。
注意事項:
1.使用DMSO前,不需要進行高壓滅菌,它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會破華它的分子結(jié)構(gòu),以至于降低冷凍保護效果。在常溫下,DMSO對人體有害,故在配制時*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃~-60℃這一溫度范圍內(nèi)過久,低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi),是“危險溫區(qū)”。
3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量,及時添加。
具體步驟:
KYSE150細(xì)胞一. 水的制備:
帛科細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):
1.溶解定容:將藥品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4·H2O 1.56g,KH2PO40. 2g )倒入盛有雙蒸水的燒杯中,玻璃棒攪動,充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml,搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶內(nèi)待消毒:將PBS倒入溶液瓶(大的吊針瓶)內(nèi),蓋上膠帽,并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒:
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關(guān),在pH為8.0、溫度為37℃時,胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時,應(yīng)把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。終止消化時,可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細(xì)胞的作用。
1.稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右)或PBS(D-hanks)液中。攪拌混勻,置于4℃內(nèi)過夜。
2.用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈臺內(nèi)用注射濾器(0.22微米微孔濾膜)抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。
Rifampicin 中文名:利福平 分子式:C43H58N4O12 植物血凝素 5mg
Ribavirin 中文名:利巴韋林 分子式:C8H12N4O5 Lectin,fromArachisHypogaea(pean)
Rhein 中文名:大黃酸 分子式:C15H8O6 植物血凝素 5mg
Retigabine 中文名:瑞替加濱 分子式:C16H18FN3O2 Lectin,fromiticumvulgaris
Repaglinide ethyl ester 中文名: 分子式:C29H40N2O4 植物血凝素(PHA)ELISAKit
1,3,5-三(甲基)苯(>98.0%(GC)) 1,3,5-Tris(bromomethyl)benzene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) PorcineansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2ELISA試劑盒豬轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
并四苯(>98.0%(HPLC)) Naphthacene 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC) 小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA 試劑盒
并四苯 (升華提) Naphthacene (purified by sublimation) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) Rat endothelial lipase (EL) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒
并五苯(以升華法化) Pentacene (purified by sublimation) 質(zhì)量規(guī)格: Humanhemoglobin-advancedglycosylationendproducts,Hb-AGEELISAKit 人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
顏料藍(lán) 15(以升華法化) Pigment Blue 15 (purified by sublimation) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) HumanAquaporin0,AQP-0ELISA試劑盒人水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酞菁(以升華法化) Phthalocyanine (purified by sublimation) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N) 植物乙醇脫氫酶總活性比色法定量檢測試劑盒20
苉(升華提) Picene (purified by sublimation) 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC) Humaissueinhibitorofmetalprotease1,TIMP-1ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5,6,11,12-四苯基并四苯(升華提) 5,6,11,12-Tetraphenylnaphthacene (purified by sublimation) 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 小鼠兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)ELISA試劑盒 ,英文名: COMT ELISA Kit
1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-十六氟酞菁銅(II)(以升華法化) 1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-Hexadecafluorophthalocyanine Copper(II) (purified by sublimation) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N)(T) 人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白(MEPE)ELISA檢測試劑盒Humanmaixexacellularphosphoglycoprotein,MEPEELISAKit 96T/48T
3,4,9,10-苝四羧酸二酐(>98.0%(T)) 3,4,9,10-Perylenetetracarboxylic Dianhydride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 大鼠素E代謝物(PGEM)試劑盒 Rat Prostaglandin E Metabolite,PGEM ELISA Kit
PPT1 Others Human 人 PPT1 / Palmitoyl-protein thioesterase 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸川芎嗪質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRLigustrazine HCl
人葡萄膜色素細(xì)胞;UM頭孢氨芐質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,一水合物Cephalexin
犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild Mo-MuLv感染的3T3細(xì)胞,Mo-MuLv/3T3細(xì)胞 LA795細(xì)胞,小鼠系肉豆蔻(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品Myristicin
人胚;MRC-5卡枯醇質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Kakuol
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-細(xì)辛脂素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品L-Asarinin
KYSE150細(xì)胞C6, 大鼠腦細(xì)胞 導(dǎo)管癌細(xì)胞,ZR-75-1細(xì)胞 J-1111(單核細(xì)胞)糊精肽,人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRAmylin,human
小鼠瘤細(xì)胞;EL4緊張素A質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRAngiotensin A
REN Others Mouse 小鼠 REN1 / Renin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRAngiotensin ConvertingEnzyme Inhibitor
6-10B, 人細(xì)胞系緊張素原(1-14),大鼠質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRAngiotensinogen (1-14) ,Rat
MS4A1 Others Human 人 CD20 / MS4A1 (aa 213-297) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 亞油酸膽酯(>95.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)Cholesterol Linoleate
細(xì)胞計數(shù):
1.蓋好蓋玻片:取一套血球計數(shù)板,將特制的蓋玻片蓋在血球計數(shù)槽上。
2.制備計數(shù)用的細(xì)胞懸液:用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中,加入5滴臺盼藍(lán)染液(0.4%)或苯胺黑,活細(xì)胞不會被染色,加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。
3.將細(xì)胞懸液滴入計數(shù)板:將待測細(xì)胞懸液吹均勻,然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入,要保證蓋片下充滿懸液,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。
4.統(tǒng)計四個大格的細(xì)胞數(shù):將血球計數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察,并移動計數(shù)板,當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計數(shù)方格后,數(shù)出四角的四個大鉻(每個大格含有16個中鉻)中沒有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。
5.計算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計算細(xì)胞密度:
(細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù))/ml= ( 四個大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104
說明:公式中除以4因為計數(shù)了4個大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以2因為細(xì)胞懸液于染液是1:1稀釋。
公式中乘以104因為計數(shù)板中每一個大格的體積為:
1.0mm(長)×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3