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產(chǎn)品簡稱：HS766T細(xì)胞
中文名稱：人細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E0739

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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Mannitol  69-65-8  中文名：甘露醇  分子式：C6H14O6  度：98.5%  關(guān)鍵詞：  劑; 脫水劑; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠褪黑素(MT)ELISAKit  

Mannioside A  1038922-95-0  中文名：  分子式：C39H62O13  度：%  關(guān)鍵詞：  螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISAKit  

m-Anisic acid  586-38-9  中文名：間茴香酸  分子式：C8H8O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISAKit  

Manidipine dihydrochloride  89226-75-5  中文名：鹽酸馬尼地平  分子式：C35H40Cl2N4O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠血小板因子3(PF-3)ELISAKit              

Malic acid 4-Me ester  66178-02-7  中文名：  分子式：C5H8O5  度：%  關(guān)鍵詞：  中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠褪黑素   英文名稱：   Mouse Melatonin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MLT
鹽酸苯海拉明-d6  Diphenhydramine-d6 Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 真菌/酵母細(xì)胞細(xì)胞壁分離試劑盒20

普侖司特半水合物  Pranlukast hemihydrate  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 真菌/酵母細(xì)胞線粒體DNA萃取試劑盒10/20

(R)-美托洛爾  (R)-Metoprolol  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 真菌/酵母細(xì)胞線粒體分離(粗提)試劑盒10

α-羥基美托洛爾(非對映)  α-Hydroxy Metoprolol(Mixture of Diastereomers)  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 真菌/酵母細(xì)胞線粒體分離(活性)試劑盒10

(S)-美托洛爾  (S)-Metoprolol  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 真菌/酵母細(xì)胞總RNA分離試劑盒20

O-去甲基美托洛爾  O-Desmethyl Metoprolol  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 真菌/酵母纖維素酶(cellulase)活性比色法定量檢測試劑盒20

草酸脫氫氨氯地平  Dehydro Amlodipine Oxalate  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 真菌/酵母腺苷酸激酶(Adenylatekinase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20

(R)-氨氯地平  (R)-Amlodipine  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 真菌/酵母總巰基含量比色法定量檢測試劑盒20

阿瑞匹坦-標(biāo)記d4  Aprepitant - Labeled d4  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 真菌NADPH氧化酶活性比色法定量檢測試劑盒20(10樣本)

阿瑞匹坦-M3代謝物  Aprepitant-M3 Metabolite  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 真菌格蘭-韋革氏(Gram-Weige)染色試劑盒50
大鼠降鈣素   英文名稱：   calcitonin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CAL  Procaine hydrochloride  中文名：鹽酸普魯卡因  分子式：C13H21ClN2O2 

大鼠激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISAKit     Toltrazuril  69004-03-1  中文名：托曲珠利  分子式：C18H14F3N3O4S  度：98.0%   

大鼠活化素A受體抗體(ACV-RAb)ELISAKit     Periplocoside M  中文名：北五加皮苷M  分子式：C34H52O9 

大鼠環(huán)0酸腺苷   英文名稱：   cyclic adenosine monophosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CAMP  Procaine hydrochloride  1951/5/8  中文名：鹽酸普魯卡因  分子式：C13H21ClN2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

大鼠環(huán)0酸鳥苷   英文名稱：   Cyclic guanosine monophosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   cGMP  Procaine hydrochloride  1951/5/8  中文名：鹽酸普魯卡因  分子式：C13H21ClN2O2
HS766T細(xì)胞Brinzolamide  138890-62-7  中文名：布林佐胺  分子式：C12H21N3O5S3    人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒           

Tetraethyl ranelate  58194-26-6  中文名：  分子式：C20H26N2O8S    人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISAKit  

3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt  219921-94-5  中文名：  分子式：C23H37N3O5    人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISAKit  

Sunitinib malate  341031-54-7  中文名：蘋果酸舒尼替尼  分子式：C26H33FN4O7    人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISAKit  

Butenafine hydrochloride  101827-46-7  中文名：鹽酸布替萘芬  分子式：C23H28ClN    人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISAKit
注意事項(xiàng)：
HS766T細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太?。?/span>
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。