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細(xì)胞的凍存：
1.先將凍存管放入4℃冰箱，約40min。
2.接著置于-20℃冰箱，約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過夜。
4.置于液氮罐中長期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時做好凍存記錄，在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。

產(chǎn)品簡稱：N BK1細(xì)胞
中文名稱：人永生化食管上皮細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：食管上皮；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E01525

注意事項：
1.使用DMSO前，不需要進(jìn)行高壓滅菌，它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會破華它的分子結(jié)構(gòu)，以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下，DMSO對人體有害，故在配制時*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃～-60℃這一溫度范圍內(nèi)過久，低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi)，是“危險溫區(qū)”。
3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量，及時添加。

具體步驟：
N BK1細(xì)胞一. 水的制備：
帛科細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈，不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)：
1.溶解定容：將藥品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4·H2O 1.56g，KH2PO40. 2g ）倒入盛有雙蒸水的燒杯中，玻璃棒攪動，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml，搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶內(nèi)待消毒：將PBS倒入溶液瓶（大的吊針瓶）內(nèi)，蓋上膠帽，并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒：
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37℃時，胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時，應(yīng)把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。終止消化時，可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細(xì)胞的作用。
1.稱取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液濃度為0.25％，用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水（若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右）或PBS（D-hanks）液中。攪拌混勻，置于4℃內(nèi)過夜。
2.用注射濾器抽濾消毒：配好的胰酶溶液要在超凈臺內(nèi)用注射濾器（0.22微米微孔濾膜）抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。

細(xì)胞計數(shù)：
1.蓋好蓋玻片：取一套血球計數(shù)板，將特制的蓋玻片蓋在血球計數(shù)槽上。
2.制備計數(shù)用的細(xì)胞懸液：用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中，加入5滴臺盼藍(lán)染液（0.4％）或苯胺黑，活細(xì)胞不會被染色，加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。
3.將細(xì)胞懸液滴入計數(shù)板：將待測細(xì)胞懸液吹均勻，然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入，要保證蓋片下充滿懸液，注意蓋片下不要有氣泡，也不能讓懸液流入旁邊槽中。
4.統(tǒng)計四個大格的細(xì)胞數(shù)：將血球計數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察，并移動計數(shù)板，當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計數(shù)方格后，數(shù)出四角的四個大鉻（每個大格含有16個中鉻）中沒有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。
5.計算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計算細(xì)胞密度：
（細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù)）/ml＝ （ 四個大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104
說明：公式中除以4因為計數(shù)了4個大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以2因為細(xì)胞懸液于染液是1：1稀釋。
公式中乘以104因為計數(shù)板中每一個大格的體積為：
1.0mm（長）×1.0mm（寬）×0.1mm（高）＝0.1mm3 而 1ml＝1000mm3

Loroglossin  58139-22-3  中文名：  分子式：C34H46O18    Rat bradykinin (BK) ELISA Kit 大鼠舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒

6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose  202337-44-8  中文名：6-O-對羥基苯甲酰葡萄糖  分子式：C13H16O8    HumanAi-ypsin,ATELISAKit 人抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Cerebroside D  113773-89-0  中文名：腦苷脂D  分子式：C43H81NO9    Humandecay-acceleratingfactor,DAFELISA試劑盒人降解加速因子(DAF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Ethyl chlorogenate  425408-42-0  中文名：綠原酸乙酯  分子式：C18H22O9    組織IRAK4激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Tenuifoliside A  139726-35-5  中文名：遠(yuǎn)志蔗糖酯A  分子式：C31H38O17    Humanplasmin/fibrinolysin,PL/FbnELISAKit人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鹽酸阿利克侖  Aliskiren Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物乙醇脫氫酶總活性比色法定量檢測試劑盒20

埃博霉素A  Epothilone A  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物乙酰輔酶A膽乙酰轉(zhuǎn)移酶(ACAT)活性比色法定量檢測試劑盒20

1-萘乙酰精胺三鹽酸  1-Naphthylacetyl Spermine Trihydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物乙酰輔酶A膽乙酰轉(zhuǎn)移酶(ACAT)活性熒光定量檢測試劑盒20

精胺鹽六水合物  Spermine Phosphate Hexahydrate  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COACARBOXYLASE)活性比色法定量檢測試劑盒20

N-(4-羥基苯乙酰)-精胺  N-(4-Hydroxyphenylacetyl)-spermine  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物源性食品芥麥(Buckwheat)試劑盒20

精胺氮氧化加合物  Spermine NONOate  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物源性食品開心果(Pistachio)試劑盒20

精胺二鹽  Spermine diphosphate salt  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物源性食品山核桃(pecan)試劑盒20

雷尼替丁-N,S-二氧化物  Ranitidine-N,S-dioxide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物源性食品土豆(potato)試劑盒20

去甲基雷尼替丁  Desmethyl Ranitidine  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物源性食品小麥(wheat)試劑盒20

雷尼替丁N-氧化物  Ranitidine N-Oxide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 植物源性食品腰果(cashew)試劑盒20
二氧化快速測試盒    dioxide rapid test case  α-Spinasterol glucoside  中文名：α-菠甾醇葡萄糖苷  分子式：C35H58O6 

二氫二醇脫氫酶   英文名稱：   Human Dihydrodiol Dehydrogenas 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DDH2  3β-Hydroxyporiferast-5-en-7-one  145163-97-9  中文名：  分子式：C29H48O2 

二硫赤鮮醇   5g  3-Amino-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one  中文名：3-氨基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮  分子式：C9H9N3O  度：98.0%

二0酸核糖羧化酶/加氧酶（Rubisco）試劑盒   紫外分光光度法   50管/48樣  4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid dihydrochloride  106261-49-8  中文名：甲磺酸伊馬替尼  分子式：C13H20Cl2N2O2 

二0酸核糖羧化酶/加氧酶（Rubisco）試劑盒   紫外分光光度法   25管/24樣  4,9-Dihydroxy-α-lapachone  中文名：  分子式：C15H14O5  度：98.0%
N BK1細(xì)胞5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole  116856-18-9  中文名：  分子式：C7H9N3O3    人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒  

5-Amino-1-(2-hydroxyethyl)pyrazole  73616-27-0  中文名：  分子式：C5H9N3O    人中期因子(MK)ELISA試劑盒  

Imidazo[1,2-b]pyridazine  766-55-2  中文名：  分子式：C6H5N3    人脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒  

Fenazox  61618-27-7  中文名：氨芬酸鈉  分子式：C15H14NNaO4    人脂0壁酸(LTA)ELISA試劑盒           

N-(2,6-Dimethylphenyl)-2-piperidinecarboxamide  27262-40-4  中文名：  分子式：C14H20N2O    人中期因子(MK)ELISAKit
帛科細(xì)胞工廠適用于工業(yè)批量 ，如疫苗，單克隆抗體或者制藥工業(yè)，也適用于實驗室操作和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。方便實用，有效避免污染。