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產(chǎn)品簡稱：SHEE細(xì)胞
中文名稱：永生化食管上皮細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：食管；上皮細(xì)胞

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E01034

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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Chloramphenicol  56-75-7  中文名：氯霉素  分子式：C11H12Cl2N2O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠凝血酶受體()ELISA試劑盒  

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Cerebroside D  113773-89-0  中文名：腦苷脂D  分子式：C43H81NO9  度：96.5%  關(guān)鍵詞：  激發(fā)子活性; 細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑; 子實(shí)體形成促進(jìn)劑; 對照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠尿微量蛋白elisa試劑盒   小鼠尿微量蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠尿微量蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠尿微量蛋白試劑盒、小鼠尿微量蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。
芒果苷  Mangiferin  質(zhì)量規(guī)格：≥90%,BR 小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： MC Ab ELISA Kit

毛蕊異黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)  Calycosin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)ELISA檢測試劑盒Mousemelanocyteaibody,MCAbELISAKit 96T/48T

毛蕊異黃酮苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Calycosin-7-O-β-D-glucoside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠黑素瘤細(xì)胞黏附分子(MCAM)ELISA試劑盒 ，英文名： MCAM ELISA Kit

沒食子兒茶素（標(biāo)準(zhǔn)品）  GC;  (-)-gallocatechin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠亨廷頓蛋白(HTT)ELISA試劑盒 ，英文名： HTT ELISA Kit

沒食子兒茶素沒食子酸酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  GCG;(?)-Gallocatechin gallate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

沒食子酸  Gallic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(sm Actinin-α)ELISA試劑盒 ，英文名： sm Actinin-α ELISA Kit

沒食子酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Gallic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

埃博霉素C  Epothilone C  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA檢測試劑盒MouseErythropoietin,EPOELISAKit 96T/48T

沒食子酸丙酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  Propyl gallate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒 ，英文名： EPO ELISA Kit

沒食子酸丙酯  Propyl gallate  質(zhì)量規(guī)格：AR,>99% 小鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
維生素B2/核黃素   英文名稱：   Human Vitamin B2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   VB2  Androstadienedione  897-06-3  中文名：1,4-雄烯二酮  分子式：C19H24O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

維生素B2（VB2）檢測   Detection of malic dehydrogenase  Androstadienedione  中文名：1,4-雄烯二酮  分子式：C19H24O2  度：98.0%

維生素B1（VB1）檢測   The total amino acid (TAA) detection  Androstanolone 17-benzoate  1057-07-4  中文名：雄諾龍苯甲酸酯  分子式：C26H34O3 

微量游離血紅蛋白測試盒   ace free hemoglobin test case                 Retigabine  150812-12-7  中文名：瑞替加濱  分子式：C16H18FN3O2 

微量游離血紅蛋白（FHb）測定試劑盒（比色法）  Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt  中文名：  分子式：C28H42N6O8S2
SHEE細(xì)胞2-Aminothiazol-4-acetic acid  中文名：2-氨基噻唑-4-乙酸  分子式：C5H6N2O2S  度：98.0%  小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒  

Ampicillin Trihydrate  中文名：氨芐西林三水酸  分子式：C16H19N3O4S  度：98.0%  小鼠β酚(β-naphthol)LISA試劑盒           

2-Acetylfluorene  中文名：2-乙酰芴  分子式：C15H12O  度：98.0%  小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒  

1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole  中文名：1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑  分子式：C8H12N2  度：98.0%  小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒  

(1R,2S)-2-Amino-1,2-diphenylethanol  中文名：(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式：C14H15NO  度：99.0%  小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒
注意事項(xiàng)：
SHEE細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太??；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。