產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | E1317 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品簡稱:NK細胞
產(chǎn)品名稱:NK細胞
規(guī)格:瓶
貨號:E1317
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
NK細胞 | E1317 |
帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應(yīng)管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細胞實驗用(一般性的傳代,保存細胞,為實驗提供細胞等),25ml一般是用來復蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項:
1.細胞復蘇
將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中,加入37oC預熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%(過量不足,過晚細胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細胞一代,即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間,非細胞有絲分裂次數(shù))時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度)進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細胞凍存
當細胞密度達到80%~90%時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。
細胞凍存和復蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品:
乙二安四乙酸二鈉鋅鹽100克2~8℃ Human vasopeptidase inhibitors (VPI) ELISA Kit 人活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒
28631-66-5本胺藍CI 42755 HumanAi-phosphatidylserineaibody,APSAELISAKit 人抗1脂酰絲氨酸抗體(APSA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
氧化鈣shēng huà shì jì容量:500克 HumanEpinephrine/Adrenaline,EPIELISA試劑盒人(EPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反-4-甲氧基肉桂酸 4-Methoxycinnamic acid,≥98.0% 943-89-5 10G 通用試劑 組織PRK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
L-柏安醇 L(+)-Lqucinol 7233-40-6 Humanp53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKit人P53(P53)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蝸牛凝集素shēng huà shì jì容量:25克 MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISA試劑盒小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(植酸鈉) ELISAKitIL-1α小鼠白介素1α規(guī)格:48T/96T
L-天冬酸-β-鹽酸鹽1公斤 EscherichiacoliProtein,E.coliPELISAKit大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
哈爾滿減 BcNISTqRINq MONOHYDRcTq 44-21-3 人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
PCRDNAMARKER*DRYICE*DNA Marker生物技術(shù)級100RXNFrozen 小鼠骨涎蛋白(BSP)免疫試劑盒 Mouse Bone sialoprotein,BSP ELISA kit
沙門氏菌顯色培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:100張/盒 豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒 ,英文名: LTD4 ELISA Kit
Poly-L-Lysine 25mg/100mg/1g原裝 Sigma P1274 Two amine oxidase (DAO) ELISA Kit 人氧化酶(DAO)ELISA試劑盒
DNAMarkerⅢ25克 RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/RLAⅡELISAKit 兔主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
D(+)-密二糖一水 》99.0% 6-O-cLPHc-D-GcLcCTOPYRcNOSYL-D-GLUCOSq MONOHYDRcTq 66009-10-7 CLIAKitforBetaGAL(HumanAlpha-galactosidase)ELISAKit人β半乳糖苷酶規(guī)格:48T/96T
A.C.Eformide毛細管電泳級甲先胺測序級50ML1975-2-7Frozen 細菌鹽還原酶總活性比色法定量檢測試劑盒20次
NK細胞末端轉(zhuǎn)移酶shēng huà shì jì容量:500毫克 小鼠BH3相互作用域死亡激動劑(Bid)ELISA試劑盒 ,英文名: Bid ELISA Kit
CollagenIV 1g Worthington原裝 人骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA檢測試劑盒HumanCTX-2ELISAKit 96T/48T
N-壬?;?/span>-N-甲基葡萄糖胺100克 大鼠鈣激活中性蛋白酶1(CAPN1)免疫試劑盒 Rat calpain 1,CAPN1 ELISA Kit
減性藍6B cLKcLI BLUq 6B 8004-90-8 CLIAKitforvaspin(MouseVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor)ELISAKit小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑規(guī)格:48T/96T
青醋;青基醋;青基醋醋 Cycnoccqtic ccid;Mclonic Mononitnilq 1937/9/8 膜電位依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級熒光測定試劑盒20次
注意事項:
NK細胞(1)預熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點燃酒精燈:注意火焰不能太??;
(5)嚴格的無菌操作;
(6)貼壁細胞消化適度:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作,每種細胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。