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細(xì)胞的凍存：
1.先將凍存管放入4℃冰箱，約40min。
2.接著置于-20℃冰箱，約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過(guò)夜。
4.置于液氮罐中長(zhǎng)期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時(shí)做好凍存記錄，在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。

產(chǎn)品簡(jiǎn)稱(chēng)：鼓膜上皮干細(xì)胞
產(chǎn)品名稱(chēng)：鼓膜上皮干細(xì)胞

規(guī)格：瓶

貨號(hào)：E1360

注意事項(xiàng)：
1.使用DMSO前，不需要進(jìn)行高壓滅菌，它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu)，以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下，DMSO對(duì)人體有害，故在配制時(shí)*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃～-60℃這一溫度范圍內(nèi)過(guò)久，低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi)，是“危險(xiǎn)溫區(qū)”。
3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量，及時(shí)添加。

具體步驟：
鼓膜上皮干細(xì)胞一. 水的制備：
帛科細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈，不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)：
1.溶解定容：將藥品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4·H2O 1.56g，KH2PO40. 2g ）倒入盛有雙蒸水的燒杯中，玻璃棒攪動(dòng)，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml，搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶?jī)?nèi)待消毒：將PBS倒入溶液瓶（大的吊針瓶）內(nèi)，蓋上膠帽，并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒：
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37℃時(shí)，胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。終止消化時(shí)，可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。
1.稱(chēng)取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液濃度為0.25％，用電子天平準(zhǔn)確稱(chēng)取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水（若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右）或PBS（D-hanks）液中。攪拌混勻，置于4℃內(nèi)過(guò)夜。
2.用注射濾器抽濾消毒：配好的胰酶溶液要在超凈臺(tái)內(nèi)用注射濾器（0.22微米微孔濾膜）抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。

細(xì)胞計(jì)數(shù)：
1.蓋好蓋玻片：取一套血球計(jì)數(shù)板，將特制的蓋玻片蓋在血球計(jì)數(shù)槽上。
2.制備計(jì)數(shù)用的細(xì)胞懸液：用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中，加入5滴臺(tái)盼藍(lán)染液（0.4％）或苯胺黑，活細(xì)胞不會(huì)被染色，加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。
3.將細(xì)胞懸液滴入計(jì)數(shù)板：將待測(cè)細(xì)胞懸液吹均勻，然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入，要保證蓋片下充滿懸液，注意蓋片下不要有氣泡，也不能讓?xiě)乙毫魅肱赃叢壑小?/span>
4.統(tǒng)計(jì)四個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)：將血球計(jì)數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察，并移動(dòng)計(jì)數(shù)板，當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計(jì)數(shù)方格后，數(shù)出四角的四個(gè)大鉻（每個(gè)大格含有16個(gè)中鉻）中沒(méi)有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。
5.計(jì)算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計(jì)算細(xì)胞密度：
（細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù)）/ml＝ （ 四個(gè)大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104
說(shuō)明：公式中除以4因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以2因?yàn)榧?xì)胞懸液于染液是1：1稀釋。
公式中乘以104因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為：
1.0mm（長(zhǎng)）×1.0mm（寬）×0.1mm（高）＝0.1mm3 而 1ml＝1000mm3

氧化金shēng huà shì jì容量：RT500毫升  英文名稱(chēng)RatmalondialchehycheELISAKit大鼠二(MDA)規(guī)格：96T/48T

1115-69-1N-乙酰-DL-α-酸2-Acetylamino-propionic acid  酒類(lèi)精氨酸(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

GENEPAGE6%*CLDPAK*6% GENE-PAGE 19:1, 7 M 尿素生物技術(shù)級(jí)4X500MLCOLD  ELISAKitLDH人乳酸脫氫酶規(guī)格：48T/96T

硅膠 Nano fumed silica,100-140目 7631-86-9 500G 通用試劑  小鼠白介素23(IL-23)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

乳醋脫輕酶(+4℃) L-Lcctic dqxy7nogqncsq 9001-60-9  People deoxidizing urine three phosphoric acid (DP) ELISA Kit 人脫氧尿三(DP)ELISA試劑盒
銅片1克2～8℃  兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)免疫試劑盒 Rabbit Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit

345-35-7鄰扶錄芐alpha-Chloro-o-fluorotolue  溶酶體相關(guān)膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA試劑盒 ，英文名： HLAMP-2 ELISA Kit

去核酸酶試劑1克RT  PorcineTestoterone,TELISA試劑盒豬睪同(T)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-基茴香硫醚 4-(Methylthio)aniline,98% 104-96-1 5G 通用試劑  Humanai-Actinaibody,AAAELISA試劑盒人抗肌動(dòng)蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鄰本二加醋二正忻酯;本二加醋二忻酯;鄰酞醋二正忻酯 Di-n-octyl o-phthclctq;DOP 117-84-0  Humanbasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6ELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
肉桂醛shēng huà shì jì容量：100克  色酸羥化酶(TPH)ELISA試劑盒 ，英文名： TPH ELISA Kit

連四鹽肉糖基礎(chǔ)NA  PorcineOrexinB,OX-BELISA試劑盒豬食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

亞甲基藍(lán)shēng huà shì jì容量：100克  Humanandrogeeceptor,ARELISA試劑盒人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4--2- 4-Fluoro-2-nitroanisole,98% 445-83-0 5G 通用試劑  Humanarylhydrocarboeceptor,AhRELISAKit人芳香烴受體(AhR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

錄亞鉑醋鉀 dipotcssium tqtrcchloroplctinctq 1002-99-7  人β酚(β-naphthol)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鼓膜上皮干細(xì)胞麥迪、麥白霉素檢定培養(yǎng)基支RT  HumanchemerinELISAKit人chemerinELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

98%(劇毒)Hexametxyleneimine  人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

無(wú)水四硼酸鈉1克  兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒 Rabbit Lactoferrin,LTF/LF ELISA kit

2-甲氧基乙醇 2-Methoxyethanol,99.8% 109-86-4 100ML 通用試劑  素D合成酶(PGDS)ELISA試劑盒 ，英文名： PGDS ELISA Kit

偶氮脒類(lèi)引發(fā)劑V60/偶氮二/2,2-偶氮二/2，2′偶氮二(2-甲基)/發(fā)孔劑N/AIBN/VAZO64 高純，98%，及 250克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口  rabbitImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
帛科細(xì)胞工廠適用于工業(yè)批量 ，如疫苗，單克隆抗體或者制藥工業(yè)，也適用于實(shí)驗(yàn)室操作和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。方便實(shí)用，有效避免污染。