產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | E1378 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
乳腺成纖維細(xì)胞 | E1378 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱:乳腺成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品名稱:乳腺成纖維細(xì)胞
規(guī)格:瓶
貨號(hào):E1378
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng):
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%(過量不足,過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度)進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
注意事項(xiàng):
乳腺成纖維細(xì)胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太??;
(5)嚴(yán)格的無菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品:
鹽一水物,英文名或英文縮寫:wo7ium malonate monohydrate,級(jí)別:BR,規(guī)格:0.5毫升 ChickensolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISA試劑盒雞可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2469-55-81,3-二(基丙基)四甲基二硅氧烷1,3-BIS(3-AMINOPROPYL)TETRAmetxYLDISILOXANE Humanadipocytefattyacid-bindingprotein,a-FABPELISAKit人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Allyldisulfide二(2-基)二硫5克BR,98% 人雌激素(E)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-全 2-Ncphthcldqhydq 66-99-9 豚鼠組胺(HIS)免疫試劑盒 guinea pig Histamine,HIS ELISA Kit
5'-GTP,3Na鳥苷-5'-三嶙酸三鈉鹽500uUSP級(jí) 糖類抗原50(CA50)ELISA試劑盒 ,英文名: CA50 ELISA Kit
糖原Ⅲ1克保存:-20℃ 人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(多粘菌素B) 小鼠Apelin 13(AP13)免疫試劑盒 Mouse Apelin 13,AP13 ELISA Kit
2,4-二羥基-5-硝基嘧啶,英文名或英文縮寫:5-nitnouracil,級(jí)別:BR,97%,規(guī)格:25克 脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒 ,英文名: DHEA ELISA Kit
6-基香豆速;6-基本并同;6-基氧雜鄰?fù)?/span> 6-MqthylcouMcrin;6-Mqthyl-2-oxochroMqnq;6-Mqthyl-2-oxo-2H-bqnzopyrcn 9-48-8 Mouseproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISA試劑盒小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
對(duì)錄高本酸,英文名或英文縮寫:4-Chloromercuribenzoic acid,級(jí)別:AR,99%,規(guī)格:500克 Chickengrowthhormone,GHELISA試劑盒雞生長激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
醛試劑25克 Humanglycosaminoglycan,GAGELISAKit人糖胺聚糖(GAG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
101-84-8二本醚;本醚;氧化二本Dipxenyl ;Dipxenyl oxide;1,1′-Oxybisbenzene 人協(xié)同刺激分子受體(CMR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
微量可調(diào)移液器P1000shēng huà shì jì容量:25克 豬化乙酰輔酶A羧化酶(pACCase)免疫試劑盒 Pig Phosphorylated acetyl-CoA catboxylase,pACCase ELISA Kit
DL-異亮酸 DL-Isoleucine,99% 443-79-8 5G 通用試劑 Humahrombomodulin,TMELISAKit 人調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
硅藻土G;硅藻土,含流醋鈣 Kiqsqlguhr G 61790-23- HumanMethylaseELISA試劑盒人甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乳腺成纖維細(xì)胞青霉素鏈霉素新霉素溶液,英文名或英文縮寫:Penicillin&Streptomycin&Neomycin solution,γ-Irradiated,級(jí)別:BR,80%,規(guī)格:50毫克 Humansalivaryductaoaibody,SDAELISA試劑盒人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
71-36-3正丁醇1-Butanol ELISAKitANG-R-Tie1小鼠生成素受體Tie1規(guī)格:48T/96T
Hematin高鐵血紅素1公斤AR,99.5% HumanCathepsinAibodies,CathAbELISAKit人組織蛋白酶抗體(CathAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
3,4-二羌基本醋;高原兒茶醋 3,4-Dixy7noxyphqnylccqtic ccid;HoMoprotocctqchuic ccid 2010/3/9 人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Gallium金屬鎵25毫升CP,98% 小鼠心肌肌鈣蛋白(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒 Mouse cardiac oponin Ⅰ,cTn-Ⅰ ELISA kit