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PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：前病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

FibroFectagen? 成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒,CRYSTALLINE(環(huán)已亞胺)超級100MGCOLD

CD52 Others Rat 大鼠 CD52 / CDW52 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鄰安基本加醋(易制讀-1) cnthrcnilic ccid 118-9-3

人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLNystatin制真菌素250毫克BR，魚鱗提取

TMNE細(xì)胞，化學(xué)轉(zhuǎn)化小鼠鼻咽上皮細(xì)胞 C6(腦細(xì)胞) 牛腎細(xì)胞;MDBKL-焦谷酸25克

EFNB1 Protein Human 重組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)(NAA)
Z-HL16C細(xì)胞，人胚突變癌細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞,COS-6細(xì)胞 CL-0074DLD-1(人腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2去乙酰地爾硫卓Desacetyl Diltiazem質(zhì)量規(guī)格：美國進口

SW620(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2去[5-(2-二甲氨基)乙基]地爾硫卓Des[5-(2-dimethylamino)ethyl] Diltiazem質(zhì)量規(guī)格：美國進口

HPAEC-c 人肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞(HPAEC) 500,000cells 顱蓋造骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)N,N-去二甲基地爾硫卓鹽酸鹽N,N-Didesmethyl Diltiazem Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進口

腎實質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)O-去乙酰-N-去甲基地爾硫卓O-Desacetyl-N-desmethyl Diltiazem質(zhì)量規(guī)格：美國進口

SEMA4A Others Human 人 SEMA4A / Semaphorin-4A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-去甲基地爾硫卓鹽酸鹽N-Desmethyl Diltiazem Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進口
前病毒PCR檢測試劑盒說明書THP1細(xì)胞，人單核細(xì)胞型瘤 人導(dǎo)管瘤細(xì)胞,BT-474細(xì)胞 非必需氨基酸　100XNEAA4-叔丁基二苯硫(>98.0%(GC))4-tert-Butyldiphenyl Sulfide質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO雙(4-羥苯基)硫(>98.0%(GC))Bis(4-hydroxyphenyl) Sulfide質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

IL18BP Others Human 人 IL18BPa 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-(二乙基氨基)苯二苯腙(>98.0%(HPLC)(N))4-(Diethylamino)benzaldehyde Diphenylhydrazone質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N)

猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4-1,1'-二萘胺(>98.0%(HPLC)(N))1,1'-Dinaphthylamine質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N)

IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,2'-二萘胺(>98.0%(GC))2,2'-Dinaphthylamine質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
F9 小鼠γ-球蛋白(牛)shēng huà shì jì容量：100克

SIGIRR Others Human 人 SIGIRR / TIR8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-(二環(huán)己基膦基)-1-本基吲哚 95% (NMR) 2-(Dicyclohqxylphosphino)-1-phqnylindolq 740812-36-2

人臍內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC鋁片shēng huà shì jì容量：RT500克

PSG6 Others Human 人 PSG6 / PSG10 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Na-本甲酰-L-精酰胺鹽酸鹽shēng huà shì jì容量：25毫克

CL-0302PA319(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×27579-20-63-基-4-羧酸3-Aminoisonicotinic acid
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。