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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP4114 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
恙蟲病東方體PCR檢測試劑盒說明書 | Orientia tsutsugamushiPCR | BKP4114 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
非洲綠猴腎細(xì)胞;VEROBenzethoniumchloride海胺16221公斤試劑級
LRG1 Others Human 人 LRG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1，2-本并(+4℃) 1,2-BqNZcNTHRcCqNq 26-22-3
眼晶狀體上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鉬 MolybdqnuM 7439-98-7
Jurkat E6-1細(xì)胞，人T細(xì)胞瘤 人癌細(xì)胞,4T1細(xì)胞 上皮細(xì)胞生長添加物-2EpiCGS-26-甲基25克
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2(3-7萬)(多聚-L-賴酸)
AAV-293細(xì)胞，人人胚腎細(xì)胞 大鼠心肌細(xì)胞,H9c2(2-1)細(xì)胞 CL-0332Dami(人巨核細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸卡替洛爾（標(biāo)準(zhǔn)品）2(1H)-QUINOLINONE質(zhì)量規(guī)格：鑒別
BC-019(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2二甲磺酸阿米三嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）Almitrine Bismesylate質(zhì)量規(guī)格：含量測定
HMEpC-c 人類上皮細(xì)胞(HMEpC) 500,000cells 人神經(jīng)細(xì)胞HN蘿巴新（標(biāo)準(zhǔn)品）Raubasine質(zhì)量規(guī)格：含量測定
原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml卡莫氟(標(biāo)準(zhǔn)品)Carmofur質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法含量測定用
CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 尼可占替諾（煙酸占替諾）標(biāo)準(zhǔn)品Xanthinol nicotinate質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法含量測定用
恙蟲病東方體PCR檢測試劑盒說明書LS180細(xì)胞，人腺癌細(xì)胞 人眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞,MuM-2B細(xì)胞 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]阿普斯特;CC10004Apremilast;CC-10004質(zhì)量規(guī)格：>98%,PDE4和TNF-α抑制劑
HGC-27(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2氨丁三醇（標(biāo)準(zhǔn)品）TRISTEARIN質(zhì)量規(guī)格：鑒別
CD244 Others Human 人 2B4 / SLAMF / CD244 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸替扎尼定（標(biāo)準(zhǔn)品）Tizanidine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定
人肺微內(nèi)皮細(xì)胞HPMECTubastatin A HCLTubastatin A Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,HDAC6抑制劑
CASK Others Human 人 CASK Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸莫索尼定（標(biāo)準(zhǔn)品）Moxonidine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：含量測定
尿道上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)2′-脫氧胞苷-5′-三嶙酸三鈉鹽25克
CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 6-錄-1-羌基本并三氮坐 (Cl-HOBt) (2-8℃) 6-Chloro-1-xy7noxibqnzotriczol 6198-19-6
小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1GUANIDINExy7noCHLORIDE鹽酸胍蛋白組學(xué)級250G1950-1-1RT
973細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠成骨細(xì)胞系,MC3T3-E1細(xì)胞 CL-0138Lec1(倉鼠卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2瓊脂糖凝膠6Bshēng huà shì jì容量：20KU
THP-1(人髓系單核細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2POPSO 25g/100g原裝 Amresco J597
特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：恙蟲病東方體PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
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