產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4498 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱(chēng)】: 克氏錐蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
【英文名稱(chēng)】: Trypanosoma cruziPCR
【貨號(hào)】: BKP4498
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
克氏錐蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
Benzyl L-(+)-mandelate 62173-99-3 中文名:L-(+)-扁桃酸芐酯 分子式:C15H14O3 成纖維生長(zhǎng)因子-4 英文名稱(chēng): fibroblast growth factor 4 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): FGF-4
N-Benzoyl-leucine 17966-67-5 中文名:N-苯甲?;?/span>-亮氨酸 分子式:3 成纖維生長(zhǎng)因子-4 英文名稱(chēng): fibroblast growth factor 4 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): FGF-4
N6-Benzoyladenine 4005-49-6 中文名:N6-苯甲?;汆堰?/span> 分子式:C12H9N5O 素 英文名稱(chēng): Human Renin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): RN
Betamipron 3440-28-6 中文名:倍他米隆 分子式:C10H11NO3 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白1 英文名稱(chēng): Human Retinoblastoma Protein 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): RBP1
6-Benzyloxypurine 57500-07-9 中文名:6-芐氧基嘌呤 分子式:C12H10N4O 松弛素-2 英文名稱(chēng): Human Relaxin-2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): RLN-2
細(xì)菌乙醇脫氫酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次 2-Amino-3-Formylchromone 中文名:2-氨基-3-甲?;?/span> 分子式:C10H7NO3 度:98.0%
細(xì)菌乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次 2-Amino-4-chlorobenzothiazole 中文名:2-氨基-4-氯苯并噻唑 分子式:C7H5ClN2S 度:98.0%
細(xì)菌乙醇比色法定量檢測(cè)試劑盒20次 2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole 2349-67-9 中文名:2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑 分子式:C2H3N3S2 度:98.0%
細(xì)菌樣品二維電泳裂解液用于細(xì)菌蛋白二維電泳 2-Amino-6-chloropurine 中文名:2-氨基-6-氯嘌呤 分子式:C5H4ClN5 度:98.0%
細(xì)菌樣品二維電泳裂解液用于細(xì)菌蛋白二維電泳 2-Amino-6-chlorobenzothiazole 95-24-9 中文名:2-氨基-6-氯苯并噻唑 分子式:C7H5ClN2S 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
克氏錐蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)Hs 578T人癌細(xì)胞 Hs human breast cancer cell line 578T DMEM+10%FBS琥珀酸;丁二酸質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%Succinic acid
ADIPOQ Protein Human 重組人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)琥珀酸;丁二酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Succinic acid
人胚;MRC-5 QBC-939, 人細(xì)胞 Humanα-乳香酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品alpha-Boswellic acid
小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞;MC3T3-E1野馬追內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Eupalinolide A
SERPINC1 Others Cynomolgus 食蟹猴 SerpinC1 / AithrombinIII / ATIII 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 紅霉素C質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Erythromycin C
IL22RA2 Others Human 人 IL22BP / IL22RA2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基25克2~8℃,避光
人低侵襲性脈絡(luò)膜色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A腺苷;;;腺速苷;胰苷;腺呤配糖;腺尿環(huán)核苷 cdqnosinq 28-61-7
CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 雙[三(羥甲基)]基... BIS-TRIS (cell culture tested, ≥98%) 6976-37-0 25G 通用試劑
CoC2(懸浮) BENZALKONIUMCHLORIDE,50%SOLUTION本扎錄,50%溶液美國(guó)國(guó)家處方集級(jí)白色至淡黃色粘稠液體RT不sigma
COLO 205人細(xì)胞 COLO 205 human colon cancer cells 1640+10% FBSFicoll400 10g/25g Pharmacia分裝
PCR檢測(cè)試劑盒:
克氏錐蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。