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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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錐蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):BKP4502
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2024-12-20
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BKP4502
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測(cè)或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

錐蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒說明書

Trypanosoma spp.PCR

BKP4502

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:錐蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   
優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

Betaxolol   中文名:鹽酸倍他洛爾  分子式:C18H30ClNO3  度:98.0%  豚鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Ciprofloxacin   中文名:鹽酸環(huán)丙沙星  分子式:C17H19ClFN3O3  度:98.0%  豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Lincomycin   中文名:鹽酸林可霉素  分子式:C18H35ClN2O6S  度:98.0%  豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Diphenhydramine   中文名:鹽酸苯海拉明  分子式:C17H22ClNO  度:98.0%  豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

   中文名:鹽酸利多卡因  分子式:C14H23ClN2O  度:98.0%  豚鼠端粒酶(TE)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
纖維素酶(CL)測(cè)試盒   可見分光光度法   50/24              3-Aminoadamantan-1-ol  中文名:  分子式:C10H17NO 

纖維蛋白原(FIB)測(cè)試盒(半自動(dòng)凝血儀)  Rifampicin  中文名:利福平  分子式:C43H58N4O12 

纖維蛋白原 (Fibrinogen)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  Atorvastatin calcium  134523-03-8  中文名:阿托伐他汀鈣  分子式:C33H35FN2O5  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

纖溶酶原激活劑抑制因子2   英文名稱:   Human Plasminogen Activator Inhibitor 2   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   PAI2  Aspirin  50-78-2  中文名:阿司匹林  分子式:C9H8O4 

纖溶酶原激活劑抑制因子1   英文名稱:   Human Plasminogen Activator Inhibitor 1   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   PAI-1  Aspirin  50-78-2  中文名:阿司匹林  分子式:C9H8O4  度:99.0%
錐蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒說明書HPrSMC Pellet 人類平滑肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNAHA cDNA芝麻素質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,BRSesamin

CL-0106HFL1()5×106cells/瓶×2芝麻素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Sesamin

KIR2DL4 Others Human KIR2DL4 / CD158D CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 槲皮素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Quercetin 3-O-glucoside-7-O-rhamnoside

人表皮色素細(xì)胞-淺色素裂解物HELM-l L知母皂苷A3(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC(ELSD)>97%,標(biāo)準(zhǔn)品Timosaponin A3

新生牛眼晶體上皮細(xì)胞;NBLE 人細(xì)胞,SW579細(xì)胞 RIN-m5F細(xì)胞,小鼠β瘤細(xì)胞正十五烷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:內(nèi)標(biāo)N-PENTADECANE
人前脂肪細(xì)胞-皮下HPA-swo7iumMETABISULFITE焦亞鈉(重亞鈉)ACS級(jí)白色粉末RTsigma

ERN1 Others Human ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 二苯基 Diphenylcarbinol,99% 91-01-0 25G 通用試劑

長尾綠猴胚胎細(xì)胞;4179碳醋胍;碳醋亞安脲;胍碳醋鹽 Gucnidinq ccronctq 293-82-1

HL-7702細(xì)胞,肝細(xì)胞 人腺癌細(xì)胞,LS180細(xì)胞 CM-R037大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLPROTEINMWMARKER,HIGHRANGE蛋白Marker生物技術(shù)級(jí)液體FROZENsigma

大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]577-11-7多庫酯鈉Docusate wo7ium
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。


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